(주)라트바이오;서울대학교산학협력단;SEOUL NATIONAL UNIVERSITY R&DB FOUNDATION;서울대학교산학협력단;LART BIO CO., LTD.;(주)라트바이오
发明人:
JANG GOO,장구,YUM SOO YOUNG,염수영,GIM GYEONG MIN,김경민,LEE WON YOU,이원유,PARK JIHYUN,박지현
申请号：
KR1020190065615
公开号：
KR1020200020580A
申请日:
2019.06.03
申请国别(地区):
KR
年份:
2020
代理人:
摘要：
The present invention relates to methods of producing transgenic embryos and transgenic animals, producing an engineered nuclease component. The method of producing transgenic embryos disclosed in the present invention comprises microinjecting a vector into fertilized eggs or embryos, wherein the vector comprises a transposon gene and polynucleotide encoding the engineered nuclease component, and the vector is a plasmid vector or a viral vector. The method of producing transgenic animals disclosed in the present invention comprises: i) producing transgenic embryos expressing the engineered nuclease component； and ii) transplanting the transgenic embryos into the uterus of a surrogate mother.본 명세서는 인위적 뉴클레아제의 구성요소를 생산하는 형질전환 배아 및 형질전환 동물의 제작 방법에 관한 것이다.본 명세서에 의해 개시되는 내용에 따른 인위적 뉴클레아제의 구성요소가 발현되는 형질전환 배아 제작 방법은, 트랜스포존 유전자 및 상기 인위적 뉴클레아제의 구성요소를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 벡터를 수정란 또는 배아에 미세주입 하는 것 -이 때, 상기 벡터는 플라스미드 벡터 또는 바이러스성 벡터임-；을 포함한다.본 명세서에 의해 개시되는 내용에 따른 인위적 뉴클레아제의 구성요소가 발현되는 형질전환 동물 제작 방법은, i) 상기 인위적 뉴클레아제의 구성요소가 발현되는 형질전환 배아를 제작하는 것； 및 ii) 상기 형질전환 배아를 대리모의 자궁에 이식하는 것；을 포함한다.본 명세서는 유전자 편집된 게놈을 가지는 형질전환 배아의 제작 방법에 관한 것이다. 본 명세서에서 개시되는 내용에 따른 유전자 편집된 게놈을 가지는 형질전환 배아의 제작 방법은 알엔에이-가이드 엔도뉴클레아제를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 게놈을 가지는 수정란 또는 배아에 상기 타겟 사이트에 결합할 수 있는 가이드 핵산을 제공하는 것을 포함한다. 나아가, 본 명세서에서 개시되는 내용에 따른 유전자 편집된 게놈을 가지는 형질전환 배아의 제작 방법은 상기 수정란 또는 상기 배아에 도너 폴리뉴클레오타이드를 제공하는 것을 더 포함한다.또한, 본 명세서는 유전자 편집된 형질전환 동물의 제작 방법에 관한 것이다. 본 명세서에 의해 개시되는 내용에 따른 타겟 사이트에서 유전자 편집된 게놈을 가지는 동물 제작 방법은, i) 알엔에이-가이드 엔도뉴클레아제를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하며, 상기 타겟 사이트에서 유전자 편집된 게놈을 가지는 배아를 제작하는 것； 및 ii) 상기 배아를 대리모에 이식하는 것； 을 포함한다.
