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一种点突变血小板无力症小鼠模型的构建方法
- 专利权人:
- 南通大学附属医院
- 发明人:
- 周鹭,江淼,杨飞
- 申请号：
- CN202010978984.6
- 公开号：
- CN112063654A
- 申请日:
- 2020.09.17
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明提供一种点突变血小板无力症小鼠模型的构建方法，包括如下步骤：(1)载体设计和构建、体外转录：(1‑1)根据基因信息及实验要求，设计gRNA和Donor Oligo的序列；(1‑2)合成Donor Oligo，构建gRNA载体；(1‑3)将gRNA载体和Cas9载体进行体外转录；(2)显微注射及F0代鼠的鉴定；(3)F1代鼠的繁殖和鉴定：将步骤(2)中性成熟的阳性F0鼠分别与野生型鼠配繁一代，最终提供至少3只经PCR和测序验证的F1代点突变GT小鼠模型；(4)冷冻保种。本发明首次用CRISPR/Cas9技术精准编辑构建点突变血小板无力症小鼠模型，该模型精准编辑小鼠的基因，比以往通过抗体注射诱导或者基因敲除技术构建的GT小鼠模型更为精准。为深入研究GT的发病机制及探索新的治疗方法提供了很好的模型。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
