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人WIPI2-shRNA慢病毒载体、构建方法与应用
- 专利权人:
- 南京大学医学院附属鼓楼医院
- 发明人:
- 袁献温,丁义涛,孙喜太,施晓雷
- 申请号：
- CN201610457343.X
- 公开号：
- CN105925581A
- 申请日:
- 2016.06.22
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明属于慢病毒载体制备领域，具体涉及一种人WIPI2‑shRNA慢病毒载体、构建方法与应用，合成针对RNA干扰靶点序列的DNA oligo的正链和反链；所述的正链和反链退火形成带粘性末端的双链DNA；通过酶切使慢病毒载体线性化，使线性化载体与步骤（1）得到的双链DNA连接；将连接产物转化大肠杆菌感受态细胞，对得到的阳性克隆进行PCR鉴定；质粒抽提，用于下一步病毒包装。本发明构建的人WIPI2‑shRNA慢病毒载体，将载体质粒转染后得到包装并浓缩的病毒，病毒再侵染目的细胞，实现了WIPI2基因干扰，降低WIPI2基因的表达，降低被病毒侵袭的细胞生长速率，提高被病毒侵袭的细胞凋亡率。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
