您的位置：
首页
>
农业专利
>
详情页
一种抑制人EDARADD基因表达的shRNA、慢病毒载体及其构建方法和应用
- 专利权人:
- 徐州市中心医院
- 发明人:
- 孟箭,李梦,白玉婷,李晓东,管俊杰,王守鹏
- 申请号：
- CN201910916304.5
- 公开号：
- CN110747195A
- 申请日:
- 2019.26.09
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种抑制人EDARADD基因表达的shRNA、慢病毒载体及其构建方法和应用,首先合成针对RNA干扰靶点序列的DNA oligo的正链和反链;正链和反链退火形成带粘性末端的双链DNA;通过酶切使慢病毒载体线性化,将线性化载体与双链DNA连接;将连接产物转化大肠杆菌感受态细胞,对得到的阳性克隆进行PCR鉴定;质粒抽提,用于下一步病毒包装。本发明以EDARADD基因为模板设计了RNA干扰靶点序列,根据选取的靶点序列设计shRNA干扰序列,包装构建RNA干扰慢病毒载体,对EDARADD基因进行敲减后,会显著影响舌鳞癌细胞CAL‑27细胞的增殖,影响细胞克隆形成能力,并促进细胞的凋亡。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
