本发明涉及分子生物学和基因工程技术领域,旨在提供一种烟粉虱C型溶菌酶Btlys‑c基因及所编码蛋白的制备与应用。该烟粉虱c型溶菌酶Btlys‑c基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所提供的烟粉虱C型溶菌酶(Btlys‑c)基因及其编码的核苷酸序列,使其能够应用在大肠杆菌中表达新的蛋白、编码序列。所述抗菌活性的重组蛋白纯化后进行抑菌实验的结果表明:重组的烟粉虱C型溶菌酶(Btlys‑c)基因原核表达的重组蛋白具有抗革兰氏阳性菌的能力。进一步的,利用本发明的方法通过现有基因工程方法生产,在开发抗菌类药物、食品保鲜剂和饲料添加剂等方面具有潜在的应用价值。