The purpose of the present invention is to provide a technology whereby, in a method for manufacturing a sweetener composition containing glucose, fructose and allulose, said method comprising treating glucose with glucose isomerase and allulose epimerase, the content of allulose in the sweetener composition is increased.A sweetener composition containing glucose, fructose and allulose and having a high allulose content can be continuously manufactured at a high efficiency by immobilizing glucose isomerase and allulose epimerase, packing the same into a column so as to give an activity ratio of the immobilized glucose isomerase to the immobilized allulose epimerase of 1.49:1-5.61:1, and then passing a glucose solution through the column.Lobjet de la présente invention est de pourvoir à une technologie caractérisée en ce que, dans un procédé de fabrication dune composition dédulcorant contenant du glucose, du fructose et de lallulose, ledit procédé comprenant le traitement du glucose avec une glucose isomérase et une allulose épimérase, la teneur en allulose dans la composition dédulcorant est accrue. La composition dédulcorant contenant du glucose, du fructose et de lallulose et ayant une teneur élevée en allulose peut être fabriquée en continu à un rendement élevé par immobilisation dune glucose isomérase et allulose épimérase, garnissage dune colonne avec celles-ci de façon à obtenir un rapport dactivité glucose isomérase immobilisée à allulose épimérase immobilisée de 1,49:1-5,61:1, puis passage dune solution de glucose dans la colonne.本発明の目的は、グルコースに対して、グルコースイソメラーゼ及びアルロースエピメラーゼを作用させて、グルコース、フラクトース及びアルロースを含む甘味料組成物を製造する方法において、該甘味料組成物におけるアルロースの含有比率を高める技術を提供することである。 グルコースイソメラーゼ及びアルロースエピメラーゼを固定化し、固定化グルコースイソメラーゼと固定化アルロースエピメラーゼの活性比率が1.49:1~5.61:1になるようにカラムに充填し、該カラムにグルコース溶液を通液することによって、グルコース、フラクトース及びアルロースを含み、且つアルロースの含有比率が高い甘味料組成物を連続的で効率的に製造できる。