The present invention relates to a culture medium for regulating T cell cultures derived from peripheral blood mononuclear cells and a method of culturing conditioned T cells using the same. More particularly, the present invention relates to a culture medium for culture of T cells, And the effect of promoting differentiation and mass proliferation of regulatory T cells in the composition was confirmed. In addition, it was confirmed that the regulated T cells proliferated by the method of the present invention can remarkably effectively inhibit the activity and proliferation of target immune cells. Accordingly, the present invention relates to a medium composition for afzelin-based culture and a method for culturing regulatory T cells using the same. Also, the peripheral blood mononuclear cell-regulated T cells cultured by the method according to the present invention can be used as a pharmaceutical composition highly effective in the treatment of autoimmune diseases. Further, the culture medium composition of the present invention can be used as such in the treatment of autoimmune diseases.본 발명은 말초혈액단핵구 유래 조절 T 세포 배양용 배지 조성물 및 이를 이용한 조절 T 세포 배양방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 항-CD3 단클론항체, 항-CD28 단클론항체, TGF-β, 아프젤린을 배지 조성물에 포함하는 경우 조절 T 세포의 분화 촉진 및 대량 증식 효과를 확인하였다. 또한, 본 발명의 방법으로 증식된 조절 T 세포는 타겟 면역세포의 활성 및 증식을 월등히 효과적으로 억제할 수 있음을 확인하였다. 이에 본 발명은 아프젤린 기반의 배지 조성물 및 이를 이용한 조절 T 세포의 배양방법에 관한 것이다. 또한 본 발명에 따른 방법으로 배양한 말초혈액단핵구 유래 조절 T 세포들은 자가면역질환 치료에 매우 유효한 약학 조성물로 사용할 수 있다.나아가 본 발명의 배지 조성물은 그 자체로 자가면역질환 치료에 이용될 수 있다.