Provided is a method of preparing chimeric antigen receptor T cells by serum-free culture. The method comprises steps of: (a) providing PBMC cells； (b) performing negative sorting treatment on the PBMC cells to obtain sorted PBMC cells； (c) activating the sorted PBMC cells to obtain activated T cells； (d) transfecting the activated T cells with a viral vector expressing a chimeric antigen receptor, so as to obtain transfected T cells； (e) removing the viruses from the transfected T cells to obtain virus-removed T cells； and (f) subjecting the virus-removed T cells to expansion culture to obtain chimeric antigen receptor T cells.L'invention concerne une méthode de préparation de lymphocytes T récepteurs d'antigènes chimériques par culture sans sérum. La méthode comprend les étapes consistant à : (a) fournir des cellules PBMC； (b) effectuer un traitement de tri négatif sur les cellules PBMC pour obtenir des cellules PBMC triées； (c) activer les cellules PBMC triées pour obtenir des lymphocytes T activés； (d) transfecter les lymphocytes T activés avec un vecteur viral exprimant un récepteur d'antigène chimérique, de manière à obtenir des lymphocytes T transfectés； (e) éliminer les virus des lymphocytes T transfectés pour obtenir des lymphocytes T dont les virus sont éliminés； et (f) soumettre les lymphocytes T dont les virus sont éliminés à une culture d'expansion pour obtenir des lymphocytes T récepteurs d'antigènes chimériques.
