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一种分离产氢衣藻叶绿体的方法
专利权人:
中国科学院植物研究所
发明人:
黄芳,孙永乐,张锦,陈梅
申请号:
CN201310276602.5
公开号:
CN104277974B
申请日:
2013.07.03
申请国别(地区):
中国
年份:
2017
代理人:
关畅
摘要:
本发明公开了一种分离产氢衣藻叶绿体的方法。该方法包括如下步骤:1)将衣藻悬于裂解液中,加入皂素至其终浓度为0.25g/100mL;2)将步骤1)溶液置于冰上1‑2min裂解衣藻细胞;3)将步骤2)溶液4℃2300g离心1min;4)用裂解液漂洗步骤3)沉淀,4℃1000‑2300g离心1min,得叶绿体粗提物;5)将叶绿体粗提物悬于裂解液中;6)在离心管底层加入75%体积的Percoll,上层加入45%体积的Percoll,再在最上层加入步骤5)溶液,形成梯度,4℃4600g离心20min,在两不同体积分数的Percoll之间形成墨绿色条带;7)取出墨绿色条带,用裂解液稀释,4℃890‑1000g离心2min,收集沉淀,获得所述叶绿体。实验证明,本发明方法操作简单,叶绿体产率高,用时短。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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