一种分离棉花叶绿体DNA的方法

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专利权人:

华中农业大学

发明人:

张献龙,金双侠,刘小云,刘冠泽,唐文鑫,聂以春,郭小平

申请号：

CN200710052665.7

公开号：

CN101117634A

申请日:

2007.07.09

申请国别(地区):

中国

年份:

2008

代理人:

王敏锋

摘要：

本发明属于棉花基因工程技术领域，具体涉及一种分离棉花叶绿体DNA的新方法。包括：以幼嫩的叶片为材料，用普通家用榨汁机将叶片充分匀浆，利用A、B、C、D四种缓冲溶液，常规速度离心，依次通过完整叶绿体的分离，裂解及叶绿体DNA(cpDNA)分离纯化三个连续步骤，最终获得棉花叶绿体DNA纯品。本发明制备分离的叶绿体DNA质量较高，紫外分光光度计检测表明，本发明制备的DNA样品的D₂₆₀nm/D₂₈₀nm在1.6－1.8之间；产率高达1－10μg cpDNA/g叶片样品。经过验证，以分离的cpDNA为模板完全能够满足特异性酶切、RAPD、PCR和目标基因序列的克隆等常规分子生物学操作的需要。与现有技术相比，本发明不需要超高速离心机，也不需要通过蔗糖密度梯度离心分离等设备和步骤。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/