СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИКСИРОВАННОГО ВИРУСА БЕШЕНСТВА ШТАММА "МОСКВА 3253" ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ГЕТЕРОЛОГИЧНОГО АНТИРАБИЧЕСКОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА
Российская Федерация; от имени которой выступает Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)
发明人:
Матвеева Жанна Владимировна (RU),Осина Наталья Александровна (RU),Бугоркова Татьяна Васильевна (RU),Абрамова Елена Геннадьевна (RU),Генералов Сергей Вячеславович (RU),Майоров Николай Викторович (RU),Н
申请号：
RU2012139719/10
公开号：
RU2012139719A
申请日:
2012.09.17
申请国别(地区):
RU
年份:
2013
代理人:
摘要：
FIELD: chemistry.SUBSTANCE: invention relates to field of biotechnology and deals with method of quantitative determination of fixed rabies virus strain "Moskva 3253". Method includes decontamination and separation of RNA from virus-containing material, carrying out reaction of reverse transcription and polymerase chain reaction with hybridization-fluorescence account of results in "real time" mode with application of specific primers RV5-5-GTTGGGCACTGAAACTGCTA-3, RV6-5-GAATCTCCGGGTTCAAGAGT-3 and probe RV7-5-ROX-AATCCTCCTTGAACTCCATGCGACAGA-BHQ2. Quantitative assessment of virus is determined on the basis of registration of signal of analysed sample fluorescence and its comparison with signal of fluorescence of PCR-standards, which contain different quantities of DNA-targets. Claimed method makes it possible to determine quantitative content of virus in rabies antigen of organ-tissue and culture origin.EFFECT: application of invention contributes to standardisation of stage of rabies antigen preparation in production of heterological anti-rabies immunoglobulin.2 tbl, 3 dwg, 2 exИзобретение относится к области биотехнологии и касается способа количественного определения фиксированного вируса бешенства штамма «Москва 3253». Способ предусматривает обеззараживание и выделение РНК из вируссодержащего материала, постановку реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме «реального времени» с использованием специфичных праймеров RV5-5-GTTGGGCACTGAAACTGCTA-3, RV6-5-GAATCTCCGGGTTCAAGAGT-3 и зонда RV7-5-ROX-AATCCTCCTTGAACTCCATGCGACAGA-BHQ2. Количественную оценку вируса определяют на основании регистрации сигнала флуоресценции исследуемого образца и сравнения его с сигналом флуоресценции ПЦР-стандартов, содержащих различные количества ДНК-мишеней. Предложенный способ позволяет определить количественное содержание вируса в рабическом антигене органо-тканевого и культурального происхождения. Использование из
