A method for producing a composition having cell killing activity and the like are provided. The method for producing a composition having cell-killing activity comprises: culturing malignant tumor-derived cells in a culture medium at least until the cell density is at a density that does not hinder passage; Replacing the physiological buffered saline with the physiological buffered saline, and collecting the physiological buffered saline after the period in which the death of the cells derived from the malignant tumor is morphologically observed in the physiological buffered saline. Including.殺細胞活性を有する組成物の製造方法等を提供する。 殺細胞活性を有する組成物の製造方法は、 悪性腫瘍由来細胞を、少なくとも細胞の密度が継代に支障のない密度になるまで培養培地中で培養すること、 前記培養後、前記培養培地を生理的緩衝塩類溶液と交換すること、及び 前記生理的緩衝塩類溶液中で、前記悪性腫瘍由来細胞の形態学的に細胞の死滅が観察される時期後、前記生理的緩衝塩類溶液を回収することを含む。