Provided are a method for generating and sequencing a biallelic knockout of a screened target gene in an eukaryotic cell using a TALEN technique, as well as a double-stranded polynucleotide comprising a TALEN plasmid pair with a cleavage site ATCTGGCCACTGATG.L'invention concerne un procédé de génération et de séquençage d'une inactivation biallélique d'un gène cible criblé dans une cellule eucaryote au moyen d'une technique TALEN, ainsi qu'un polynucléotide bicaténaire comprenant une paire de plasmides TALEN avec un site de clivage ATCTGGCCACTGATG.