PROBLEM TO BE SOLVED: To develop a technique applicable to mammalians widely without need of using ES cells, which enables use of a technique for targeting a specific sequence on a genome and modifying a specific gene (genome editing techniques, such as ZFN) only by an extremely simple technique.SOLUTION: The invention provides a technique for efficiently modifying any mammalian target gene by immersing a mammalian fertilized egg in the condition with a zona pellucida in pronucleus stage into a solution comprising a pair molecule of mRNA having a specific sequence giving three-step multiple electroporation pulses of square electric pulse with a given range of the total electric energy of a first electric pulse to perform electroporation process.COPYRIGHT: (C)2015,JPO&INPIT【課題】 ES細胞を利用する必要なく哺乳類に広く適用可能な技術であって、ゲノム上の特定配列を標的として特定遺伝子を改変する技術(ZFN等のゲノム編集技術)を、極めて簡便な手法のみで利用可能とする技術を、開発することを課題とする。【解決手段】 前核期にある透明帯を有した状態の哺乳類の受精卵を、特定配列を有するmRNAのペア分子を含む溶液に浸漬し、第1電気パルスの総電力量を所定範囲にして3段階方式の矩形波多重パルスを与えて電気穿孔処理を行うことにより、哺乳類の任意の標的遺伝子を効率良く改変する技術を提供する。【選択図】 図5
