Examples include methods for producing protein-PEG conjugates. The method can include providing an aqueous protein solution. The aqueous protein solution may contain protein, pH buffering agent, and chelating agent. The chelating agent can be selected from aminopolycarboxylic acids, hydroxyaminocarboxylic acids, N-substituted glycines, 2- (2-amino-2-oxooctyl) aminoethanesulfonic acid (BES), and deferoxamine (DEF). The method can include introducing sodium cyanoborohydride and methoxypolyethylene glycol aldehyde into an aqueous protein solution. Sodium cyanoborohydride may have a molar ratio in the methoxypolyethylene glycol aldehyde ranging from about 5: 1 to about 1.5: 1. The method can further include reacting the protein with methoxypolyethylene glycol aldehyde to form a protein-PEG conjugate. The pH buffer can maintain the pH of the aqueous protein solution during the reaction in the range of 4.0 to 4.4.例は、タンパク質－ＰＥＧコンジュゲートの製造方法を含む。方法はタンパク質水溶液を提供することを含み得る。タンパク質水溶液はタンパク質、ｐＨ緩衝剤、及びキレート剤を含み得る。キレート剤はアミノポリカルボン酸、ヒドロキシアミノカルボン酸、Ｎ－置換グリシン、２－（２－アミノ－２－オキソクチル）アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、及びデフェロキサミン（ＤＥＦ）から選択され得る。方法はタンパク質水溶液にシアノ水素化ホウ素ナトリウム及びメトキシポリエチレングリコールアルデヒドを導入することを含み得る。シアノ水素化ホウ素ナトリウムはメトキシポリエチレングリコールアルデヒド中、約５：１～約１．５：１の範囲のモル比を有してもよい。方法はさらに、メトキシポリエチレングリコールアルデヒドとタンパク質を反応させてタンパク質－ＰＥＧコンジュゲートを形成することを含み得る。ｐＨ緩衝剤は、反応の間のタンパク質水溶液のｐＨを４．０～４．４の範囲に維持することができる。
