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腺病毒载体系统及重组腺病毒构建方法
- 专利权人:
- 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
- 发明人:
- 刘红岩,鲁茁壮,洪涛
- 申请号:
- CN201811262788.8
- 公开号:
- CN109295096A
- 申请日:
- 2018.29.10
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要:
- 提供一套腺病毒载体系统及重组腺病毒构建方法。载体系统包括腺病毒质粒pKAd5f11p‑EF1aP和pKAd5f11pES‑PmeI,以及穿梭质粒pUC19‑PM。腺病毒质粒含有E1/E3缺失的人5型腺病毒(HAdV‑5)基因组,并且原HAdV‑5fiber基因由HAdV‑5和HAdV‑11p的融合基因F5‑11p替代;含有的PmeI位点为外源基因插入部位。pKAd5f11p‑EF1aP质粒在原E1区添加人EF1a启动子。穿梭质粒pUC19‑PM与pKAd5f11pES‑PmeI质粒配套使用。重组腺病毒构建方法包括:PCR扩增获得两侧含有同源重叠区的目的基因片段,与PmeI线性化的腺病毒质粒进行DNA组装,得到含有外源目的基因的腺病毒质粒;或者先将多个基因片段克隆到穿梭质粒,再使用限制性内切酶切下含全部目的基因的片段,与PmeI线性化的pKAd5f11pES‑PmeI进行DNA组装,获得含有外源目的基因的腺病毒质粒。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/