本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆及其构建方法。该方法以甘薯湖北曲叶病毒为材料对病毒基因组通过无缝克隆技术插入植物表达载体中,得到含有2倍甘薯湖北曲叶病毒全基因组重组载体;所述重组载体即为甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆;所述甘薯湖北曲叶病毒基因组DNA序列如SEQ ID NO:8所示。本发明首次制备得到能通过农杆菌浸润法接种侵染本氏烟的甘薯湖北曲叶病毒侵染性克隆,对进一步研究甘薯湖北曲叶病毒致病机制、甘薯病毒基因功能、病毒与寄主互作、弱毒株系创制等研究奠定基础,研究结果具有重要意义和参考价值。