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一种具有多等位基因p53编码序列的重组腺病毒的制备方法
- 专利权人:
- 赛诺(深圳)生物医药研究有限公司
- 发明人:
- 迪奥斯达·德鲍蒂斯塔,徐卫
- 申请号：
- CN202010386150.6
- 公开号：
- CN111534546A
- 申请日:
- 2020.05.09
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 一种具有多等位基因p53编码序列的重组腺病毒的制备方法，包括有如下步骤：采用寡核苷酸的第一DNA接头修饰pUC18质粒，并将含有p53表达盒的片段克隆至修饰后质粒中，然后分别采用第二DNA接头及第三DNA接头修饰后得到的两种质粒进行匹配产生具有p53等位基因双拷贝的中间质粒，将中间质粒中的SpeI‑SalI片段导入至穿梭质粒中，获得p53等位基因双拷贝的穿梭质粒将穿梭质粒pSTL‑TDMp53(1+2)采用Pme1酶切使之线性化，然后和伙伴pAdEasy质粒一起通过电穿孔导入进宿主细菌，通过宿主细菌的细胞内进行同源重组，提取其含有p53编码序列等位基因双拷贝的表达盒和腺病毒骨架的质粒，然后通过电穿孔手段导入HEK‑293细胞，产生具有p53编码序列等位基因双拷贝的重组腺病毒。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
