Disclosed are a serum-free freezing medium used in adipose-derived stem cells and a method for establishing an adipose-derived stem cell library. The serum-free freezing medium comprises a serum-free culture medium, dimethyl sulfoxide and a serum substitution component KSR the defects of unstable freezing quality of the adipose-derived stem cells and influence of harmful factors in serum on the adipose-derived stem cells are solved, and the adipose-derived stem cells stored have the advantages of high survival percentage, well adherence growth and strong differentiation capacity.Linvention concerne un milieu de congélation dépourvu de sérum utilisé dans des cellules souches issues du tissu adipeux, et un procédé pour létablissement dune banque de cellules souches issues du tissu adipeux. Le milieu de congélation dépourvu de sérum comprend un lieu de culture dépourvu de sérum, du diméthylsulfoxide et un composant de substitution du sérum, KSR les défauts dune qualité instable de congélation des cellules souches issues du tissu adipeux et linfluence de facteurs dangereux dans le sérum sur les cellules souches issues du tissu adipeux sont résolus et les cellules souches issues du tissu adipeux stockées ont les avantages dun pourcentage élevé de survie, dune bonne croissance adhérente et dune forte capacité de différentiation.