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標的DNAに変異が導入された植物細胞、及びその製造方法
专利权人:
NATIONAL INSTITUTE OF AGROBIOLOGICAL SCIENCES
发明人:
YOKOI Ayako,横井 彩子,TOKI Seiichi,土岐 精一
申请号:
JPJP2015/054610
公开号:
WO2015/125862A1
申请日:
2015.02.19
申请国别(地区):
WO
年份:
2015
代理人:
摘要:
This method for producing a plant cell to which a mutation has been introduced to target DNA includes: a step for introducing into a plant cell a DNA construct that contains DNA homologous to the target DNA and in which a PiggyBac transposon containing a marker gene has been introduced to the homologous DNA and a desired mutation has been introduced a step for selecting, with the expression of the marker gene as an indicator, plant cells to which the target DNA has been introduced by means of homologous recombination of the mutation and the PiggyBac transposon and a step for eliminating the PiggyBac transposon from the target DNA by means of constitutive expression of the PiggyBac transposon in the cells selected in the aforementioned step.Linvention concerne un procédé de production dune cellule végétale dans laquelle une mutation a été introduite pour cibler un ADN, qui comprend : une étape dintroduction dans une cellule végétale dune construction dADN contenant un ADN homologue à lADN cible, et dans lequel un transposon PiggyBac contenant un gène marqueur a été introduit dans lADN homologue et une mutation désirée a été introduite une étape de sélection, grâce à lexpression du gène marqueur servant dindicateur, des cellules végétales dans lesquelles lADN cible a été introduit au moyen dune recombinaison homologue de la mutation et du transposon PiggyBac et une étape délimination du transposon PiggyBac de lADN cible au moyen de lexpression constitutive du transposon PiggyBac dans les cellules sélectionnées dans létape susmentionnée.標的DNAと相同なDNAを含むDNA構築物であって、該相同DNAにマーカー遺伝子を含むpiggyBacトランスポゾンが挿入されており、かつ所望の変異が導入されているDNA構築物を、植物細胞に導入する工程と、 前記変異及び前記piggyBacトランスポゾンが相同組換えによって標的DNAに導入された植物細胞を、前記マーカー遺伝子の発現を指標として選択する工程と、 前記工程にて選択された細胞に、piggyBacトランスポゼースを恒常的に発現させ、前記piggyBacトランスポゾンを前記標的DNAより除去する工程とを含む、標的DNAに変異が導入された植物細胞の製造方法。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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