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一种高效提取食用菌菌丝体营养生长阶段RNA的方法
- 专利权人:
- 齐鲁工业大学
- 发明人:
- 姬丹丹,臧立华,祝德义,周茂娟,张运春
- 申请号：
- CN201510506182.4
- 公开号：
- CN105018472B
- 申请日:
- 2015.08.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 李健康
- 摘要：
- 本发明提供一种可用于食用菌菌丝体营养生长阶段RNA提取的方法，可以有效去除培养基质对RNA提取过程的干扰，RNA提取效率高、纯度高、不含PCR酶抑制剂。所述RNA提取的方法，包括前处理阶段和提取阶段，前处理阶段包括下列步骤：1)取一份布满菌丝体的培养基，粗研；2)加入适量的缓冲液I，放置摇床，保持温度35～40℃，摇床转速100～150rpm摇动2～3h；3)取步骤2)的溶液，3000～4000rpm低速离心10～15min；收集上清液；4)步骤3)中剩余的沉淀，加入缓冲液II洗涤2～5次，3000～4000rpm低速离心10～15min，取每次洗涤后的上清液合并；5)将步骤3)和步骤4)离心的上清液集中到一起，在转速10000～12000rpm，4℃离心10～15min，弃上清液，收集沉淀。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
