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一种高效提取食用菌菌丝体营养生长阶段RNA的方法
专利权人:
齐鲁工业大学
发明人:
姬丹丹,臧立华,祝德义,周茂娟,张运春
申请号:
CN201510506182.4
公开号:
CN105018472A
申请日:
2015.08.17
申请国别(地区):
中国
年份:
2015
代理人:
李健康
摘要:
本发明提供一种可用于食用菌菌丝体营养生长阶段RNA提取的方法,可以有效去除培养基质对RNA提取过程的干扰,RNA提取效率高、纯度高、不含PCR酶抑制剂。所述RNA提取的方法,包括前处理阶段和提取阶段,前处理阶段包括下列步骤:1)取一份布满菌丝体的培养基,粗研;2)加入适量的缓冲液I,放置摇床,保持温度35~40℃,摇床转速100~150rpm摇动2~3h;3)取步骤2)的溶液,3000~4000rpm低速离心10~15min;收集上清液;4)步骤3)中剩余的沉淀,加入缓冲液II洗涤2~5次,3000~4000rpm低速离心10~15min,取每次洗涤后的上清液合并;5)将步骤3)和步骤4)离心的上清液集中到一起,在转速10000~12000rpm,4℃离心10~15min,弃上清液,收集沉淀。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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