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一种高效提取食用菌菌丝体营养生长阶段DNA的方法
- 专利权人:
- 齐鲁工业大学
- 发明人:
- 祝德义,臧立华,姬丹丹,周茂娟,张运春
- 申请号:
- CN201510504560.5
- 公开号:
- CN105018471A
- 申请日:
- 2015.08.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 李健康
- 摘要:
- 本发明提供一种可用于食用菌菌丝体营养生长阶段DNA提取的方法。该方法可以有效去除培养基质对DNA提取过程的干扰,DNA提取效率高、纯度高、不含PCR Taq酶抑制剂。用于食用菌菌丝体营养生长阶段DNA提取的方法,包括前处理阶段和提取阶段,前处理阶段包括:1)取一份布满菌丝体的培养基;2)加入缓冲液I,放置于恒温摇床,35~40℃,100~150rpm摇动2~3h;3)取步骤2)的溶液,3000~4000rpm低速离心10~15min,收集上清液;4)步骤3)中剩余的沉淀,加入缓冲液II洗涤2~5次,3000~4000rpm低速离心10~15min;取每次洗涤后的上清液合并;5)将步骤3)和步骤4)离心的上清液合并,在转速1000~12000rpm,4℃离心10~15min;弃上清液,收集沉淀。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/