本发明公开了一种畜禽肉中猪、牛、羊源性成分鉴定用的引物体系以及PCR鉴定方法与试剂盒。根据动物线粒体DNA 16S rRNA基因的差异位点,设计特异性引物,见序列表SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6。PCR鉴定方法,包括提取待测样本DNA,PCR扩增。试剂盒,包括SEQ ID NO.1‑6。本发明引物均仅对各自物种目标片段进行特异性扩增,不会与其他物种发生反应,检测灵敏度较高,能有效鉴别出畜禽肉中的猪、牛、羊源性成分,该方法快速、灵敏、实用;若将该引物体系配合相关的试剂可以制成试剂盒,为工业化生产及应用提供可能,具有良好的应用前景。