本发明的目的是提供一种葡萄糖氧化酶突变体,其具有:(Ⅰ)与葡萄糖氧化酶的氨基酸序列SEQ ID NO:1具有至少70%同源性的序列;(Ⅱ)具有所述(Ⅰ)中所述的葡萄糖氧化酶的至少一个免疫表位,且所述葡萄糖氧化酶的氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列;所述取代为取代1个或2个氨基酸。本发明提供的葡萄糖氧化酶单点突变体的耐热性普遍高于野生型,而且两点突变体,与对应单点突变体相比,其耐热性又得到进一步提升,在60℃处理10min后残余酶活达到71.19%~82.92%,在65℃处理5min后残余酶活达到63.03%~72.58%,70℃处理2.5min后残余酶活达到49.91%~58.96%,75℃处理2.5min后残余酶活达到24.78%~32.05%。