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Verfahren zum Einbau von lysosomalen Transmembranproteinen in zelluläre Membranen
专利权人:
Forschungszentrum Jülich GmbH
发明人:
Agnes Csiszár,Bernd Hoffmann,Tobias Braun
申请号:
DE102013005154
公开号:
DE102013005154A1
申请日:
2013.03.26
申请国别(地区):
DE
年份:
2014
代理人:
摘要:
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Einbau von lysosomalen Transmembranproteinen in zelluläre Membranen mit den Schritten:a) Trennung vollständiger Lysosome von der Zelle, wobei die Transmembranproteine der Lysosommembranen strukturell und funktional intakt bleiben,b) Herstellung von Fusionsliposomen mit Molekülsorten A, B, und C, wobei für Molekülsorte A ein kationisches, amphipathisches Molekül, für Molekülsorte B ein aromatisches Molekül und für Molekülsorte C ein neutrales Helfer-Lipid gewählt wird,c) Herstellung fusogener Lyso-Liposomen, wobei die Lysosome mit den Fusionsliposom fusionieren, undd) Fusion der fusogenen Lyso-Liposomen mit einer Zellmembran,wobei die Reihenfolge zwischen Schritt a. und b. vertauscht sein kann und bei dem zur Herstellung der Fusionsliposome in Schritt b. drei Molekülsorten A:B:C aus DOTAP:DiO:DOPE im Verhältnis 1:0,1:1 mol/mol gewählt werden.The present invention relates to a method for installing lysosomal comprise in cellular membranes comprising the steps of:a) separation complete lysozyme some of the cell, wherein the transmembrane proteins of the lysosommembranen structurally and functionally remain intact,b) preparation of fusion liposomes with types of molecules a, b, and c, wherein for type of molecule a is a cationic amphipathic molecule, for type of molecule b is an aromatic molecule and for type of molecule c is selected to a neutral helper-lipid,c) production after lyso-liposome, wherein the lysozyme some fusion liposome, and with the fused) fusion of the fusogenic lyso-liposome with a cell membrane,the sequence between step a. and b. can be interchanged and in which for the production of the fusion liposomes in step example, three types of molecules of a: b: c of dotap: dio: dope in the ratio of 1: 0.1: 1 mol / mol are selected.
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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