本发明属于人核酸体外检测技术领域,具体为人DMD基因的PCR扩增检测系统及其应用。PCR扩增检测系统包括:引物组、PCR反应母液容器;引物组容器包含引物SEQ ID No.1~SEQ ID No.52贮存液。本发明在DNA提取情况后,通过PCR反应对人DMD基因26个外显子目的片段同时扩增,进行DMD基因外显子有无缺失突变的判断,通过测序片段的基因序列与Reference Sequence进行比对,最终进行目标序列中有无单碱基突变的判断,以期对人DMD基因全部外显子进行金标准方法探讨分析D型肌营养不良症在分子遗传水平上的发病原因。而且,本方法操作简单,使用仪器设备普及度很高,适合推广使用。