PURPOSE: A cosmetic composition containing serum-free culture medium of mesenchymal stem cells for anti-wrinkling is provided to ensure safety to the skin and antioxidation. CONSTITUTION: A cosmetic composition for improving anti-wrinkling contains serum-free culture medium of bone marrow or umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells. The medium contains 80-150 mM of glucose and 20-60 mM of glutamine. A serum-free culture medium of bone marrow or umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cell is pretreated with UV-irradiated keratinocyte culture medium.본 발명은 간엽줄기세포의 무혈청 배양액을 함유하는 피부주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 포유동물의 골수 또는 제대혈 유래 간엽줄기세포의 무혈청 배양액을 함유하는 피부주름 개선용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.본 발명에 따른 포유동물의 골수 또는 제대혈 유래 간엽줄기세포의 무혈청 배양액을 함유하는 피부주름 개선용 화장료 조성물은 간엽줄기세포 배양액에 다양하게 존재하는 싸이토카인류, 성장인자류 및 각종 생리활성물질로 인해 피부에 안전하고, 항산화능이 강력하며, 주름 개선 효과가 탁월하여 기능성 화장품의 소재로써 활용할 수 있다.