PURPOSE: A method for culturing amniotic fluid stem cell(AFSC) is provided to effectively proliferate the stem cells in a serum free MesemCult-XF medium and to minimize contamination possibility.CONSTITUTION: A method for culturing human stem cells comprises a step of sub-culturing the stem cells in a serum free medium. The medium is MesemCult-XF medium. A cosmetic composition contains the stem cell derived from a culture of human stem cells as an active ingredient. A cell therapeutic agent with improved safety contains the stem cells derived from the culture as an active ingredient.COPYRIGHT KIPO 2013본 발명은 양수줄기세포(Amniotic fluid sstem cell AFSC) 배양에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 양수로부터 원심분리하여 양수세포를 분리하고 분리된 양수세포 침전물을 AmnioMax 배지에서 7일간 배양한 후 1차계대배양부터 무혈청배지(Serum free medium)에서 계대배양함을 특징으로 하는 것으로서 무혈청배지에서 양수줄기세포는 계대배양시 종래 공지의 혈청첨가배지에서 계대배양하는 것에 비하여 양수줄기세포의 성장속도가 오히려 증가되고 SSEA-4 및 HLA-ABC 발현, Stem cell marker 및 근육세포 marker 발현 등에서 긍정적인 결과를 나타내었음을 개시한다.