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适于转基因检测的大豆干叶子中高质量DNA的提取方法
- 专利权人:
- 山东轻工业学院
- 发明人:
- 王存芳,许晓丹,刘畅,史永翠
- 申请号:
- CN201310177893.2
- 公开号:
- CN103243088B
- 申请日:
- 2013.05.14
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 杨琪
- 摘要:
- 本发明公开了一种适于转基因检测的大豆干叶子中高质量DNA的提取方法,所提取基因组DNA条带清晰,纯度高,杂质含量少,满足转基因检测所需的PCR、酶切、分子克隆、测序等分子生物学实验的需要。步骤如下:1)将大豆干叶子用Buffer I浸泡,并于40~60℃温度加热后剪碎成沫状;2)加入Buffer II,摇匀,离心,弃上清,重复至上清液澄清,取沉淀;3)加入CTAB提取液、质量浓度3%的β-巯基乙醇和蛋白酶K,55℃~65℃加热40~60分钟;4)加入等体积的酚、氯仿和异戊醇混合液,混匀,离心,取上清;5)加入等体积的氯仿和异戊醇混合液,混匀,离心,取上清;6)加入0.8倍体积预冷的异丙醇,于-20℃静置10~30分钟,离心,弃上清,洗涤,晾干,TE缓冲液溶解即得。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/