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适于转基因检测的大豆干叶子中高质量DNA的提取方法
- 专利权人:
- 山东轻工业学院
- 发明人:
- 王存芳,许晓丹,刘畅,史永翠
- 申请号：
- CN201310177893.2
- 公开号：
- CN103243088A
- 申请日:
- 2013.05.14
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 杨琪
- 摘要：
- 本发明公开了一种适于转基因检测的大豆干叶子中高质量DNA的提取方法，所提取基因组DNA条带清晰，纯度高，杂质含量少，满足转基因检测所需的PCR、酶切、分子克隆、测序等分子生物学实验的需要。步骤如下：1）将大豆干叶子用Buffer I浸泡，并于40～60℃温度加热后剪碎成沫状；2）加入Buffer II，摇匀，离心，弃上清，重复至上清液澄清，取沉淀；3）加入CTAB提取液、质量浓度3%的β-巯基乙醇和蛋白酶K，55℃～65℃加热40～60分钟；4）加入等体积的酚、氯仿和异戊醇混合液，混匀，离心，取上清；5）加入等体积的氯仿和异戊醇混合液，混匀，离心，取上清；6）加入0.8倍体积预冷的异丙醇，于-20℃静置10～30分钟，离心，弃上清，洗涤，晾干，TE缓冲液溶解即得。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
