一种高质量咖啡叶片基因组DNA的高效提取方法
- 专利权人:
- 云南省德宏热带农业科学研究所
- 发明人:
- 李锦红,杨积忠,张洪波,郭铁英,白学慧,夏红云,周华
- 申请号:
- CN201510230276.3
- 公开号:
- CN106191033A
- 申请日:
- 2015.05.05
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种高质量咖啡叶片基因组DNA的高效提取方法,改良了CTAB法,使用PVP粉增强去除酚类、多糖化合物;使用了改良Extraction buffer溶液和Lysis buffer溶液进行植物材料提取和裂解组织细胞;先将氯仿与异戊醇按24∶1(v/v)配置混合液,再与酚等体积混合加入有效去除蛋白质杂质;在沉淀DNA时,采用NaAc(60μL,3M)与冷的无水乙醇(600μL)混合沉淀剂,高速离心,以增加DNA沉淀;用预冷的无水乙醇洗涤DNA沉淀物,去除Na+。这种方法能快速高效地分离出高质量咖啡叶片基因组DNA。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心