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一种重组酪氨酸脱羧酶的可溶性高表达的方法及该酶的应用
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 倪晔,章凯
- 申请号:
- CN201310367673.6
- 公开号:
- CN103421734A
- 申请日:
- 2013.08.22
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 时旭丹`刘品超
- 摘要:
- 一种重组酪氨酸脱羧酶的可溶性高表达的方法及该酶的应用,属于酶工程技术领域。本发明公开了一株重组表达短乳杆菌酪氨酸脱羧酶TDC的基因工程菌E.coliBL21(DE3)/pET24-TDC,该基因工程菌的构建方法,高表达可溶性TDC的方法,及该酶的应用。将TDC编码基因连接表达载体并转入大肠杆菌表达宿主,通过在发酵培养基中添加葡萄糖显著提高了重组TDC(rTDC)的可溶性表达,蛋白产量达到224mg/L发酵液。采用Ni柱纯化C端带有His-Tag的rTDC,回收率90%。rTDC对于底物L-酪氨酸的比酶活为133.5U/mg。本发明的重组表达可溶性rTDC的方法具有表达水平高、纯化简单、回收率高、成本低等优点,可用于制备酪胺、多巴胺以及帕金森病的治疗研究。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/