Dislcosed are an acellular corneal method, acellular corneal stroma and a preparation method thereof, the acellular corneal method comprising the steps of: A. placing an extracted animal cornea into water and vibration treating to make epithelial layer come off B. placing the corneal into an acellular reagent and vibration treating C. placing the cornea into water and vibration treating and D. repeating steps B and step C alternately to make stroma cells and endothelial cells come off, wherein the acellular reagent contains NaCl and EDTA. The acellular corneal method can remove the corneal epithelial layer and immune cell components, thereby obtaining an intact acellular corneal stroma, wherein the acellular corneal stroma has an excellent biocompatibility and anti-degradation ability.Linvention concerne un procédé de décellularisation de la cornée, un substrat de cornée décellularisée et son procédé de préparation. Le procédé de décellularisation comprend les étapes suivantes : i) placer dans leau la cornée animale extraite, soumettre le tout à vibration pour isoler la couche épithéliale ii) placer la cornée dans le réactif décellularisé et le soumettre à vibration iii) soumettre à vibration la cornée dans leau iv) répéter en alternant les étapes ii) et iii) afin disoler les cellules du stroma et les cellules endothéliales. Le réactif décellularisé contient du NaCl et de lEDTA. Ledit procédé de décellularisation de la cornée permet de retirer rapidement et légèrement des composants cellulaires immunogènes et épithéliaux afin dobtenir un substrat de cornée décellularisée, lequel présente une bonne biocompatibilité et résistance.
