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一种鸡β干扰素优化基因及重组鸡β干扰素的生产工艺
- 专利权人:
- 华南农业大学;北京利昂盛生物技术有限公司
- 发明人:
- 焦培荣,廖明,冯赛祥,吴斯宇,孙超,孙俭波,廖想
- 申请号:
- CN201610743783.1
- 公开号:
- CN106399322A
- 申请日:
- 2016.08.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种鸡β干扰素优化基因及重组鸡β干扰素的生产工艺,包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对NCBI中已发表的鸡β干扰素基因进行密码子优化,人工合成优化后鸡β干扰素基因;S2、设计引物:根据密码子优化后的干扰素基因,设计1对引物;S3、重组表达质粒的构建;S4、重组表达质粒的转化和鉴定;S5、重组表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达;S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化:S61、包涵体的提取与处理;S62、包涵体变性;S63、变性液复性;S64、镍柱亲和纯化。本发明通过原核表达的方式表达并纯化出了重组鸡β干扰素蛋白,并通过细胞病变抑制法测出了该干扰素的具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性,活性单位达到2.73×106UI/mg。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/