This method for producing a cartilage-damage treatment agent includes a propagation step for propagating mesenchymal stem cells in a serum-free medium (A) containing FGF, PDGF, TGF-β, HGF, EGF, one or more phospholipids, and one or more fatty acids; and a mixing step for mixing the mesenchymal stem cells, an isotonic preservative, and a cytoprotective agent after the propagation step. This production method makes it possible to provide a cartilage-damage treatment agent for favorably regenerating cartilaginous tissue.L'invention concerne un procédé de production d'un agent de traitement de lésion de cartilage, qui comprend une étape de propagation pour propager des cellules souches mésenchymateuses dans un milieu sans sérum (A) contenant du FGF, du PDGF, du TGF-β, de l'HGF, de l'EGF, un ou plusieurs phospholipides et un ou plusieurs acides gras ; et une étape de mélange pour mélanger les cellules souches mésenchymateuses, un agent de conservation isotonique et un agent cytoprotecteur après l'étape de propagation. Ce procédé de production permet de fournir un agent de traitement de lésion de cartilage pour régénérer de façon favorable un tissu cartilagineux.本発明に係る軟骨損傷治療剤の製造方法は、FGF、PDGF、TGF-β、HGF、EGF、少なくとも1つのリン脂質、及び、少なくとも1つの脂肪酸を含有する無血清培地Aにおいて、間葉系幹細胞を増殖させる増殖工程と、上記増殖工程後の間葉系幹細胞、等張保存剤、及び、細胞保護剤を混合する混合工程とを包含しており、この製造方法によって、好適に軟骨組織を再生する軟骨損傷治療剤が提供される。