PROBLEM TO BE SOLVED: To provide novel acylated insulin analogues exhibiting resistance to proteases, a method for preparation of such insulin analogues, insulin preparations containing the insulin analogues, and a method of treating diabetes mellitus using these insulin analogues.SOLUTION: An acylated protease stabilized insulin formally consists of a non-protease stabilized insulin in which at least one hydrophobic amino acid has been substituted with hydrophilic amino acids. The substitution is within or in close proximity to one or more protease cleavage sites of the non-protease stabilized insulin. The protease stabilized insulin optionally further comprises one or more additional mutations with the proviso that there is only one lysine residue in the stabilized insulin. The acyl moiety is attached to the lysine residue or to an N-terminal position in the protease stabilized insulin.COPYRIGHT: (C)2015,JPO&INPIT【課題】プロテアーゼに対する耐性を示す新規のアシル化インスリンアナログ、このようなインスリンアナログの調製方法、インスリンアナログを含有するインスリン調製物、及びこれらのインスリンアナログを使用する真性糖尿病の処置方法の提供。【解決手段】アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンであって、少なくとも一の疎水性アミノ酸が親水性アミノ酸で置換された非プロテアーゼ安定化インスリンから形式的になり、ここで、該置換が非プロテアーゼ安定化インスリンの一又は複数のプロテアーゼ切断部位の内部に又はそれに近接しており、該プロテアーゼ安定化インスリンは、場合によっては一又は複数の付加的な変異をさらに有していてもよく、但し、安定化インスリンにはただ一つのリジン残基があり、アシル部分がプロテアーゼ安定化インスリンのN末端位又はリジン残基に結合している、アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリン。【選択図】図1