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一种质粒DNA规模化纯化方法
专利权人:
天津瑞普生物技术股份有限公司
发明人:
唐荣宏,李亚杰,杨保收,付旭彬,梁武
申请号:
CN201510673296.8
公开号:
CN105200038A
申请日:
2015.10.16
申请国别(地区):
中国
年份:
2015
代理人:
李明卓
摘要:
本发明提供了一种质粒DNA规模化纯化方法,该方法采用三步纯化,第一步通过加入氯化钙使细菌基因组DNA和RNA以及大部分杂蛋白凝集后,通过纱网和囊式滤器过滤去除大块杂质,然后通过较大孔径的澄清纯化滤膜过滤质粒DNA裂解液,除去裂解液中小的碎片以及基因组DNA;第二步通过较小孔径的浓缩纯化滤膜浓缩洗滤质粒DNA,达到除去质粒DNA裂解液中的小分子化学物质、杂蛋白,RNA等杂质以及实现浓缩质粒DNA等目的;第三步通过加入表面活性剂Triton X-114,去除内毒素,并再次洗滤去除杂蛋白及RNA的杂质。以上方法依托于中空纤维超滤膜澄清纯化系统对质粒DNA进行纯化和浓缩,工艺合理有效,极大的提高了质粒DNA的生产效率,降低了纯化成本。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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