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一种质粒DNA规模化纯化方法
- 专利权人:
- 天津瑞普生物技术股份有限公司
- 发明人:
- 唐荣宏,李亚杰,杨保收,付旭彬,梁武
- 申请号:
- CN201510673296.8
- 公开号:
- CN105200038A
- 申请日:
- 2015.10.16
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 李明卓
- 摘要:
- 本发明提供了一种质粒DNA规模化纯化方法,该方法采用三步纯化,第一步通过加入氯化钙使细菌基因组DNA和RNA以及大部分杂蛋白凝集后,通过纱网和囊式滤器过滤去除大块杂质,然后通过较大孔径的澄清纯化滤膜过滤质粒DNA裂解液,除去裂解液中小的碎片以及基因组DNA;第二步通过较小孔径的浓缩纯化滤膜浓缩洗滤质粒DNA,达到除去质粒DNA裂解液中的小分子化学物质、杂蛋白,RNA等杂质以及实现浓缩质粒DNA等目的;第三步通过加入表面活性剂Triton X-114,去除内毒素,并再次洗滤去除杂蛋白及RNA的杂质。以上方法依托于中空纤维超滤膜澄清纯化系统对质粒DNA进行纯化和浓缩,工艺合理有效,极大的提高了质粒DNA的生产效率,降低了纯化成本。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/