一种高产量大规模质粒制备方法
- 专利权人:
- 中国人民解放军军需大学军事兽医研究所
- 发明人:
- 涂长春,余兴龙,张茂林
- 申请号：
- CN02109351.2
- 公开号：
- CN1257274C
- 申请日:
- 2002.03.25
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2006
- 代理人:
- 陈宏伟
- 摘要：
- 本发明一种高产量大规模质粒制备方法，包括菌落培养与收集：原生质体制备：质粒的抽提纯化：用DNA检测仪测定质粒含量并用适当的酶作酶切鉴定；本工艺与碱变性-CsCl密度梯度超速离心法所制备质粒的纯度相当，而产量却大幅度提高，每1000ml大肠杆菌培养物的质粒产量达到15-23mg。第一次在上清中沉淀质粒使用20％的PEG8000而不使用异丙醇，并将沉淀加入18TE溶液溶解，加入终浓度为50-100ug/ml的蛋白酶K消化。其内毒素含量极低，与碱变性-CsCl密度梯度超速离心法的相当。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
