PROCÉDÉ DE PRODUCTION À GRANDE ÉCHELLE DESTINÉ À DES CYSTÉINES D'ANTICORPS COIFFÉES ET NON COIFFÉES ET LEUR UTILISATION DANS LA CONJUGAISON DE PROTÉINES THÉRAPEUTIQUES
Optimizing production of selectively capped, and uncapped, cysteines on antibodies by manipulation of cell growth conditions including the deliberate depletion of cysteine and/or cystine in the cell culture process by way of media components, batch duration, or cell density to achieve efficient production of proteins including antibody-drug-conjugates (ADCs).； conjugating a TNB-capped cysteine-containing protein by reacting it with a reducing agent capable of detaching the TNB-capping moieties from the protein without significantly reducing antibody inter-chain sulfur bonds, and conjugating reduced sulfur bonds on the protein to a payload through a reactive linking moiety.La présente invention concerne l'optimisation de la production de cystéines sélectivement coiffées et non coiffées sur des anticorps par la manipulation des conditions de croissance cellulaire comprenant la déplétion délibérée de la cystéine et/ou de la cystine dans le processus de culture cellulaire au moyen des constituants du milieu, de la durée du lot, ou de la densité cellulaire pour obtenir une production efficace de protéines comprenant des conjugués anticorps-médicament (ADC). L'invention concerne également la conjugaison d'une protéine contenant de la cystéine coiffée par un TNB en la faisant réagir avec un agent réducteur permettant de détacher les fractions de coiffage par TNB de la protéine sans réduire significativement les ponts de soufre interchaînes des anticorps, et la conjugaison des ponts de soufre réduits sur la protéine à une charge utile par l'intermédiaire d'une fraction de liaison réactive.
