RECOMBINANT PROTEINS FUSED OF ENTAMOEBA HISTOLYTICA (LECAG AND CYSTEINE-PROTEASE) AS ANTIGENS FOR THE PREPARATION OF VACCINES AND SEROLOGICAL DIAGNOSTIC TESTS.
DANIEL CERVANTES GARCIA,ROBERTO MONTES DE OCA LUNA,JAVIER VENTURA JUÁREZ,MARTÍN HUMBERTO MUÑOZ ORTEGA,Sandra Luz MARTÍNEZ HERNÁNDEZ
申请号:
MX2016017173
公开号:
MX2016017173A
申请日:
2016.12.15
申请国别(地区):
MX
年份:
2018
代理人:
摘要:
The present invention relates to the design of two sequences optimized for prokaryotes and eukaryotes for the synthesis of a recombinant protein comprising two Entamoeba Histolytica proteins: 1) the LECAg fragment (sequence encoding this region is between up 758aa to 1134aa of the 170kDa lectin) and 2) EhCP (a conserved region of the cysteine ??proteases representing a fragment of up to 111aa). The present invention further relates to the use of Pichia pastoris expression vectors for synthesizing such proteins from the expression vectors also containing an identification system, purification, expression of E. histolytica proteins, immunogenicity and a site for enhancing endogenous class I. Said sites are ordered as follows (sequence 6xHis, cleavage sites for enterokinase, PEDIII, LECAg fragment or EhCP, KDEL3) the proteins obtained can be used as vaccines against E. Histolytica or to generate antisera. On the other hand, the proteins are used in clinicians diagnostic methods by sero logy for the identification of antibodies produced against E. Histolytica.Esta invención se refiere al diseño de dos secuencias optimizadas para procariontes y eucariontes para la síntesis de una proteína recombinante que comprende dos proteínas de Entamoeba histolytica: 1) el fragmento LECAg (secuencia que codifica esta región está entre el 758 al 1134 aa de la lectina de 170kDa) y 2) EhCP (una región conservada de las cistein-proteasas que representa un fragmento de 111 aa). En la presente invención se refiere además uso de vectores de expresión en Pichia pastoris para sintetizar dichas proteínas a partir de los vectores de expresión contienen además un sistema de identificación, purificación, expresión de proteínas de E. histolytica, inmunogenicidad y un sitio para aumentar el procesado endógeno de clase I, estos sitios se ordenan de la siguiente manera (secuencia 6xHis, sitios de corte para enteroquinasa, PEDIII, fragmento LECAg o EhCP, KDEL3), las proteínas obtenidas pueden utilizar