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应用于组织样本中染色质超敏感位点DNase I酶切方法
- 专利权人:
- 同济大学
- 发明人:
- 李旦,刘小乐
- 申请号:
- CN201510073438.7
- 公开号:
- CN104673906A
- 申请日:
- 2015.02.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 叶敏华
- 摘要:
- 本发明涉及一种应用于组织样本中染色质超敏感位点DNase I酶切方法,首先进行组织样本前处理,然后向组织样本中加入NEHB溶液和1.15%的KCL,用组织研磨器,在冰浴中研磨后,超速离心收集细胞核;再进行脱氧核糖核酸酶I酶切反应,纯化提取酶切DNA最后胶回收DNA片段。与现有技术相比,本发明对组织的细胞核的前期收集方法进行改进,并通过细胞核的数量,优化酶切反应条件,提高了DNase I的酶切效率;其次,采用DNase I的梯度酶切方法与高通量方法的结合,不仅能够有效的获取正确的染色质片段,而且能够降低由于前期研磨样本产生的假阳性,能够在精准定位转录调控元件在全基因组上的结合位点,提高了临床样本的研究进程。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/