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应用于组织样本中组蛋白修饰染色体免疫共沉淀方法
- 专利权人:
- 同济大学
- 发明人:
- 李旦,刘小乐
- 申请号：
- CN201510073437.2
- 公开号：
- CN104651506A
- 申请日:
- 2015.02.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 叶敏华
- 摘要：
- 本发明涉及一种应用于组织样本中组蛋白修饰染色体免疫共沉淀方法，首先进行组织样本前处理；然后在冰浴中研磨后，用无菌纱布过滤，收集滤液中的细胞，悬浮在酶切消化缓冲液中水浴；将加入酶切消化缓冲液的细胞，加入微球菌核酸酶，酶切后，加入与微球菌核酸酶等量的酶切终止液；在冰浴下进行高频超声并离心处理，得到破碎的染色质溶液；取ProteinA/G，加入含牛血清白蛋白的PBS缓冲液，再加抗体孵育，加入破碎的染色质溶液，过夜孵育；在磁力架上用高盐溶液多次洗涤，洗涤后用TE溶液洗脱磁力珠上的DNA，用纯化液纯化提取DNA，用超纯水溶解DNA。与现有技术相比，本发明能够在高通量水平上精准定位组蛋白或转录因子的结合位点，提高了临床样本的检测效果。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
