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一种鸡谷胱甘肽S‑转移酶A3、原核表达及其纯化方法
- 专利权人:
- 山西农业大学
- 发明人:
- 田文霞,宁官宝,赵宇军,张鼎,宋涛,卢晓晓,李娜娜,李欣,张宁
- 申请号：
- CN201611147073.9
- 公开号：
- CN106434589A
- 申请日:
- 2016.12.13
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 温霞云
- 摘要：
- 本发明公开了一种鸡谷胱甘肽S‑转移酶A3、原核表达及其纯化方法。一种鸡谷胱甘肽S‑转移酶A3，其氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示。纯化步骤为：提取鸡胫骨生长板组织或鸡红细胞的总RNA，以Oligo dT为引物合成cDNA，并以此为模板，设计一对上、下游引物进行PCR扩增，与pGEM‑T Easy载体连接，得到pGEM‑T‑ GSTA3重组质粒，并转化至大肠杆菌感受态细胞，然后经过异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷IPTG诱导重组蛋白表达，通过Ni‑NTA亲和层析柱纯化。本发明GSTA3重组蛋白的高效表达和纯化为进一步制备其单克隆抗体，建立GSTA3快速检测方法奠定了基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
