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用原核表达系统制备重组谷胱甘肽过氧化物酶的方法
- 专利权人:
- 吉林大学
- 发明人:
- 魏景艳,宋健,邢瑞庆
- 申请号:
- CN201310142866.1
- 公开号:
- CN103224915B
- 申请日:
- 2013.04.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 王恩远
- 摘要:
- 本发明的基因工程法制备重组谷胱甘肽过氧化物酶属于生物技术的领域。先将靶基因组装到分泌型原核表达载体上,用基因突变法通过营养缺陷型原核表达系统或营养缺陷型和SPP低温联合表达系统,将GPX的催化基团SeCys引入到GPX的底物结合部位,结果赋予其高的GPX的活性;或者先将靶基因连同SeCys插入序列组装到分泌型哺乳类细胞表达载体上,再将SeCys插入序列结合蛋白2组装到胞内型哺乳类细胞表达载体上,将两种载体共转染同一哺乳细胞株,在亚硒酸钠存在下用哺乳细胞合成GPX。本发明方法简单,重组GPX活力和产量高、稳定性好,避免包涵体复性造成的产率下降和失活,从而解决天然GPX来源有限和性质不稳定问题。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/