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一种在大肠杆菌表达系统中高效表达外源蛋白的方法及其应用
- 专利权人:
- 普莱柯生物工程股份有限公司
- 发明人:
- 张许科,田克恭,李鹏昊
- 申请号：
- CN202010096475.0
- 公开号：
- CN113265365A
- 申请日:
- 2020.02.17
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2021
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及一种高效表达外源蛋白的大肠杆菌构建方法及其应用，其中，所述方法包括：步骤(1)BL21(DE3)lpxM基因的敲除；步骤(2)将tig基因插入步骤(1)得到的BL21(DE3)lpxM基因缺失株；(3)重组载体pET28a‑Rcodon的构建；(4)外源蛋白基因克隆至步骤(3)得到的重组载体pET28a‑Rcodon；(5)将步骤(4)所得重组载体转化步骤(2)得到的菌株；以及步骤(6)外源蛋白的收获。本发明方法使得外源蛋白高效表达，能较大肠杆菌常规表达显著提高外源蛋白的表达量，内毒素含量大大降低，且本发明方法可应用到多种外源蛋白的高效表达，可广泛适用于真核生物来源的蛋白在内的多种兽医疫苗蛋白，具有广泛的适用范围。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
