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日本血吸虫(中国大陆株)MFS4基因的克隆、表达和DNA疫苗
专利权人:
中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所;上海动物生物技术研究中心;农业部动物寄生虫学重点开放实验室
发明人:
林矫矫,傅志强,张亮,苑纯秀,刘金明,冯新港,蔡幼民
申请号:
CN03115732.7
公开号:
CN1477202A
申请日:
2003.03.11
申请国别(地区):
中国
年份:
2004
代理人:
王巍
摘要:
本发明涉及生物基因领域,具体涉及日本血吸虫(中国大陆株)MFS4基因的基因序列、免疫筛选、在大肠杆菌中的表达、DNA疫苗的构建及小鼠免疫保护试验。本发明基于我们对东方田鼠抗日本血吸虫病机理研究的发现,用健康东方田鼠血清IgG3抗体免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,获得一个阳性克隆,用RACE技术扩增出含ORF的基因。同源性序列分析表明其为一个新基因(MFS4),开放阅读框含780bp,编码259个氨基酸。将MFS4基因亚克隆至原核表达质粒pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a/MFS4,在BL21(DE3)表达菌中获得高效表达,融合蛋白分子量约35kD,具有良好的抗原性;将该基因亚克隆至真核表达质粒pcDNA3中,构建成重组质粒pcDNA3/MFS4,制备DNA疫苗免疫昆明系小鼠,获得28.6%的减虫率、21.73%的减卵率。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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