人可溶性鸟苷酸环化酶的高效制备方法
- 专利权人:
- 复旦大学
- 发明人:
- 谭相石,钟方芳,王红艳,黄仲贤
- 申请号：
- CN200810202926.3
- 公开号：
- CN101736022B
- 申请日:
- 2008.11.18
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 吴桂琴
- 摘要：
- 本发明属于生物工程技术领域，涉及一种制备人可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的方法。本发明方法通过如下步骤：(1)将人可溶性鸟苷酸环化酶核苷酸编码序列装入表达载体，并转化表达用大肠杆菌菌株；(2)将(1)所得菌株接种于改进后的TB培养液，IPTG诱导表达过夜；(3)将(2)所得菌体破菌，离心，过Ni-NTA柱，tev酶酶切，过Ni-NTA柱，heme重组。制得纯度达90％以上的人可溶性鸟苷酸环化酶蛋白，产量达20mg/L以上，本方法能克服目前人可溶性鸟苷酸环化酶产量较低，成本较高，不能满足对sGC的应用需求的缺陷，是目前产量最高的低成本表达方法。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
