Patatin样磷脂酶Ⅲ的可溶性表达制备方法

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专利权人:

江苏省农业科学院

发明人:

李鹏鹏,王道营,张玉梅,邹烨,孙芝兰,孙冲,张牧焓,耿志明,徐为民

申请号：

CN201710139489.4

公开号：

CN106834327A

申请日:

2017.03.10

申请国别(地区):

中国

年份:

2017

代理人:

张培元

摘要：

本发明公开了一种Patatin样磷脂酶Ⅲ的可溶性表达制备方法，该方法包括如下步骤：A、构建第一重组表达载体：将SEQ ID NO：1所示核苷酸序列插入表达载体质粒，并同时引入tev酶切位点；B、构建第一重组表达载体：将SEQ ID NO：2所示核苷酸序列插入步骤A所得第一重组表达载体的多克隆位点处，测序鉴定；C、受体转染与培养：将步骤B所得第二重组表达载体转化进大肠杆菌中，当菌体长到特定程度后低温诱导培养菌体；D、目的蛋白提取：从步骤C所得菌体中提取具有高活性的Patatin样磷脂酶Ⅲ PLP3。本发明提供了一种利用原核表达系统高效可溶性表达Patatin样磷脂酶Ⅲ的方法。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/