GRILLBERGER, Leopold,REITER, Manfred,MUNDT, Wolfgang
申请号：
ES11736502
公开号：
ES2664392T3
申请日:
2011.07.08
申请国别(地区):
ES
年份:
2018
代理人:
摘要：
Method for producing a recombinant von Willebrand factor (rvWF) composition, the method comprising the steps of: (a) providing basal cell culture media； (b) complement the basal cell culture media with copper to provide a final copper concentration of between copper 2.4 μg / l and 20 μg / l； (c) providing one or more cells comprising a nucleic acid encoding an rvWF protein； (d) culturing the one or more cells in the cell culture media supplemented with copper so that rvWF is expressed in and excreted from the cells in a culture supernatant in which the NH4 + content of the cell culture supernatant is maintained at a concentration below 4 mM； and (e) recovering at least a portion of the culture supernatant, in which the recovered supernatant has a specific ristocetin cofactor activity for rvWF of at least 30 mU / μg of rvWF.Método para producir una composición de factor de von Willebrand recombinante (rvWF), comprendiendo el método las etapas de: (a) proporcionar medios de cultivo celular basales； (b) complementar los medios de cultivo celular basales con cobre para proporcionar una concentración de cobre final de entre cobre 2,4 μg/l y 20 μg/l； (c) proporcionar una o más células que comprenden un ácido nucleico que codifica para una proteína rvWF； (d) cultivar la una o más células en los medios de cultivo celular complementados con cobre de manera que el rvWF se expresa en y se excreta de las células en un sobrenadante de cultivo en el que el contenido de NH4+ del sobrenadante de cultivo celular se mantiene a una concentración por debajo de 4 mM； y (e) recuperar al menos una parte del sobrenadante de cultivo, en el que el sobrenadante recuperado tiene una actividad de cofactor de ristocetina específica para rvWF de al menos 30 mU/μg de rvWF.
